BD Accuri C6 Plus流式細(xì)胞儀是一種可以快速檢測(cè)細(xì)胞體積、數(shù)量、周期和表型的分析技術(shù)。使用激光作為發(fā)光源，經(jīng)過(guò)聚焦整形后的光束垂直照射在樣品流上。這使得細(xì)胞或微粒上的熒光染料被激發(fā)，產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。光散射信號(hào)在前向小角度進(jìn)行檢測(cè)，這種信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大小。前向散射光(FSC)的強(qiáng)弱與細(xì)胞的大小相關(guān)，而側(cè)向散射光(SSC)的強(qiáng)弱則與細(xì)胞內(nèi)的顆粒多少相關(guān)。
 

　　熒光信號(hào)的接收方向與激光束垂直。經(jīng)過(guò)一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個(gè)不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)。這些信號(hào)用于檢測(cè)細(xì)胞上的特定標(biāo)記物，如表面蛋白或DNA含量；主要由流動(dòng)室和液流系統(tǒng)、光源與光學(xué)系統(tǒng)、信號(hào)收集與信號(hào)轉(zhuǎn)換系統(tǒng)以及計(jì)算機(jī)與分析系統(tǒng)四部分組成。具有分選功能的流式細(xì)胞儀還包括分選機(jī)制；收集到的信號(hào)由計(jì)算機(jī)系統(tǒng)進(jìn)行分析，可以定量檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞的多項(xiàng)指標(biāo)，從而提供關(guān)于細(xì)胞群體特性的詳細(xì)信息。
 

　　BD Accuri C6 Plus流式細(xì)胞儀的啟動(dòng)流程：
 

　　1、檢查所有瓶中的液面高度。
 

　　2、輕輕推開樣品支架，在上樣針處放上一根裝有至少2ml過(guò)濾去離子水的管子。
 

　　注意：樣品支架可以安放多種管子，包括任何品牌的12x75mm的管子，以及大多數(shù)離心管(不蓋蓋子)。
 

　　3、把樣品管上到適當(dāng)?shù)奈恢?，拉出樣品支架?lái)支撐管子，支架會(huì)自動(dòng)鎖在合適的位置。
 

　　注意:樣品管在上樣針頂端并不形成密封。當(dāng)將上樣針插進(jìn)樣品管時(shí)，注意不要使上樣針彎曲或者頂在管子外側(cè)。
 

　　4、用力按BD C6流式細(xì)胞儀前方的電源鍵，啟動(dòng)C6，在啟動(dòng)期間，CFlow軟件的黃色燈會(huì)亮，同時(shí)C6的泵會(huì)開始運(yùn)行。當(dāng)打開電源時(shí)，C6會(huì)自動(dòng)用鞘液沖洗液流管線。這一啟動(dòng)過(guò)程持續(xù)大約5分鐘。
 

　　注意：當(dāng)C6啟動(dòng)時(shí)，不要打開儀器的蓋子，因?yàn)榇蜷_蓋子會(huì)干擾激光預(yù)熱的過(guò)程，并延長(zhǎng)啟動(dòng)時(shí)間。
 

　　5、當(dāng)CFlow軟件的燈變綠，顯示CFlow已經(jīng)連接并準(zhǔn)備完畢(CFlowareconnectedandready)，上過(guò)濾去離子水運(yùn)行至少15分鐘，然后再進(jìn)行樣本檢測(cè)。
 

　　6、對(duì)BD C6流式細(xì)胞儀進(jìn)行質(zhì)控檢測(cè)，請(qǐng)參閱CFlow用戶指南(CFlowUser’sGuide)了解使用C6提供的質(zhì)控小球進(jìn)行質(zhì)控檢測(cè)操作的細(xì)節(jié)。
 

　　BD Accuri C6 Plus流式細(xì)胞儀的關(guān)閉操作：
 

　　1、在上樣針處放上裝有2ml過(guò)濾去離子水的管子，此時(shí)先不要在CFlow軟件中選擇任何空的樣品孔。
 

　　2、設(shè)定時(shí)間2分鐘。
 

　　3、點(diǎn)擊RUN按鍵。
 

　　4、在上樣針處放上裝有2ml去污液(Decontamination Solution,AccuriPart#KR-200)的管子。
 

　　5、選擇一個(gè)空的樣品孔。
 

　　6、設(shè)定時(shí)間2分鐘，設(shè)定流速為高速。
 

　　7、點(diǎn)擊RUN按鍵。
 

　　8、當(dāng)運(yùn)行結(jié)束，從上樣針移去清洗液管子。
 

　　9、放上裝有2ml過(guò)濾去離子水的管子，此時(shí)不要選擇任何空的樣品孔。
 

　　10、設(shè)定時(shí)間2分鐘。
 

　　11、點(diǎn)擊RUN按鍵。
 

　　12、當(dāng)運(yùn)行結(jié)束，將管子留在上樣針處。
 

　　13、按電源鍵，清洗液流循環(huán)會(huì)自動(dòng)運(yùn)行大約13分鐘，然后C6會(huì)自動(dòng)關(guān)機(jī)。
 

　　14、在C6關(guān)機(jī)的過(guò)程中，儀器會(huì)自動(dòng)運(yùn)行液流循環(huán)，先后使用去污液和鞘液清洗管路和上樣針。
 

　　注意:不是必須在關(guān)閉流式細(xì)胞儀前退出CFlow軟件或關(guān)閉計(jì)算機(jī)。